期刊简介
中华医学会、哈尔滨医科大学主办。本刊主要报道克山病、大骨节病、碘缺乏病、地方性氟、砷中毒、鼠疫、布鲁杆菌病、寄生虫等疾病的研究成果。主要栏目：述评、综述、专家论坛、论著、现场调查、临床医学、检测方法、卫生管理、学术争鸣、防治经验等。《中国地方病学杂志》被美国《化学文摘》、荷兰《医学文摘》、美国《剑桥科学文摘》和波兰《哥伯尼索引》收录;是中国自然科学、中国生物医学核心期刊，预防医学、卫生学类核心期刊。2008年获中华医学会优秀期刊二等奖，2010年获中华医学会优秀期刊奖。
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首页>中华地方病学杂志
- 杂志名称：中华地方病学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华医学会,哈尔滨医科大学
- 国际刊号：2095-4255
- 国内刊号：23-1583/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2000年获黑龙江优秀科技期刊奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 农业与生物科学研究中心文摘, 维普收录(中)
利用TaqMan探针检测大鼠心肌细胞钙调磷酸酶Aβ基因表达方法的建立
栾颖；李学奇；曹威；尹新华；童光志
关键词：TaqMan探针, 荧光定量PCR, 钙调磷酸酶, 基因表达
摘要：目的利用TaqMan探针,建立多重荧光定量PCR方法检测大鼠心肌细胞内钙调磷酸酶A(calcineurin A,CaN A)β基因表达水平的方法,为进一步研究钙调磷酸酶在钙-钙调素-钙调磷酸酶信号转导途径中的分子生物学作用打下基础.方法根据GeneBank提供的大鼠CaN Aβ和β-肌动蛋白(β-actin)基因序列,分别设计并合成特异的引物和TaqMan探针.将PCR扩增的CaN Aβ和β-actin基因片段克隆入pMD18-T载体,重组质粒pMDT-CaN Aβ和pMDT-β-actin,经筛选、鉴定和测序后,作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测;ROX和FAM标记的TaqMan探针对CaN Aβ和β-actin基因表达进行定量,用β-actin基因表达结果校正CaN Aβ;取培养的大鼠心肌细胞,RT-PCR方法测定细胞内CaN Aβ基因表达.结果应用重组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.99;与定量对照曲线比较,大鼠心肌细胞内CaN Aβ表达量是β-actin的90%.结论成功建立了利用TaqMan探针检测CaN Aβ和β-actin基因的多重荧光定量PCR方法及标准曲线.
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