期刊简介
中华医学会、哈尔滨医科大学主办。本刊主要报道克山病、大骨节病、碘缺乏病、地方性氟、砷中毒、鼠疫、布鲁杆菌病、寄生虫等疾病的研究成果。主要栏目：述评、综述、专家论坛、论著、现场调查、临床医学、检测方法、卫生管理、学术争鸣、防治经验等。《中国地方病学杂志》被美国《化学文摘》、荷兰《医学文摘》、美国《剑桥科学文摘》和波兰《哥伯尼索引》收录;是中国自然科学、中国生物医学核心期刊，预防医学、卫生学类核心期刊。2008年获中华医学会优秀期刊二等奖，2010年获中华医学会优秀期刊奖。
往期目录
-
1999
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
-
2019
首页>中华地方病学杂志
- 杂志名称：中华地方病学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华医学会,哈尔滨医科大学
- 国际刊号：2095-4255
- 国内刊号：23-1583/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2000年获黑龙江优秀科技期刊奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 农业与生物科学研究中心文摘, 维普收录(中)
尖吻蝮蛇舌状虫若虫cDNA文库的构建和免疫筛选
张玲玲；陈家旭；陈韶红；郭俭；蔡玉春
关键词：GATEWAY技术, 尖吻蝮蛇舌状虫, cDNA文库, 免疫筛选
摘要：目的 构建尖吻蝮蛇舌状虫若虫cDNA入门文库和表达文库,并对表达文库进行免疫学筛选.方法 从人工感染尖吻蝮蛇舌状虫虫卵的昆明小鼠中分离若虫,TRIzol试剂提取总RNA,分离纯化mRNA.利用Gateway克隆技术,通过BP重组反应,将合成的双链cDNA重组至入门载体pDONR222上,电转化至DH10B细胞,构建得到cDNA入门文库.从入门文库抽提质粒,经LR重组反应重组至表达载体pDEST17上,转化至BL21(DE3)细胞,得到cDNA表达文库.应用人工感染小鼠混合血清对表达文库进行免疫筛选,对筛选到的阳性克隆进行测序,利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)中的Finder程序分析阳性克隆序列的开放阅读框(ORF),BLAST(basic local alignment search tool)程序进行同源性分析,并将新发现的基因登录至GenBank.采用生物信息学软件对基因预测编码蛋白的理化性质、二级结构及B细胞表位进行分析.结果 cDNA入门文库的平均滴度的菌落形成单位(CFU)为1.45×105CFU/ml,库总容量为1.74 × 106 CFU,平均插入片段大小约为1.4 kb,插入片段范围为0.2～ 4.0 kb;表达文库的库总容量可达1.00×105 CFU,平均插入片段大小约为1.0 kb,插入片段范围为0.3 ～ 2.2 kb.对表达文库进行初步免疫学筛选,共获取到5个阳性克隆,测序后经同源性比对,在舌形虫物种内未发现同源性较高的基因,说明这5个基因序列均为尖吻蝮蛇舌状虫新基因,将新基因序列登录至GenBank,登录号为JQ180451 ～ JQ180455.利用生物信息学软件对5个阳性克隆的预测编码蛋白进行分析,发现它们均具有成为有价值的重组诊断抗原的潜能.结论 成功构建了尖吻蝮蛇舌状虫若虫cDNA文库,同时发现了尖吻蝮蛇舌状虫的5个新基因,cDNA文库的建立和新基因的发现为今后舌形虫基因功能的研究及免疫诊断抗原的筛选奠定了基础.
友情链接