期刊简介
中华医学会、哈尔滨医科大学主办。本刊主要报道克山病、大骨节病、碘缺乏病、地方性氟、砷中毒、鼠疫、布鲁杆菌病、寄生虫等疾病的研究成果。主要栏目：述评、综述、专家论坛、论著、现场调查、临床医学、检测方法、卫生管理、学术争鸣、防治经验等。《中国地方病学杂志》被美国《化学文摘》、荷兰《医学文摘》、美国《剑桥科学文摘》和波兰《哥伯尼索引》收录;是中国自然科学、中国生物医学核心期刊，预防医学、卫生学类核心期刊。2008年获中华医学会优秀期刊二等奖，2010年获中华医学会优秀期刊奖。
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首页>中华地方病学杂志
- 杂志名称：中华地方病学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华医学会,哈尔滨医科大学
- 国际刊号：2095-4255
- 国内刊号：23-1583/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2000年获黑龙江优秀科技期刊奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 农业与生物科学研究中心文摘, 维普收录(中)
基因干扰免疫球蛋白结合蛋白对氟刺激成骨细胞作用的影响
赵志涛；杨晨；王岩；李广生；徐辉
关键词：氟化物, 成骨细胞, RNA干扰
摘要：目的 通过RNA干扰技术观察在不同剂量氟暴露条件下,成骨细胞内免疫球蛋白结合蛋白(binding immunoglobulin protein,BiP)表达减少对细胞成骨标志物和关键转录因子表达的影响.方法 采用小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)作为细胞体外培养模型.取对数生长期MC3T3-E1细胞,接种子96孔板,培养24h后,加入含不同剂量氟离子[0.0(对照组)、0.1、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、20.0、32.0、64.0 mg/L]的培养液,于培养第1、3、7、14天采用Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞活性.不同剂量氟离子(2.0、8.0、20.0 mg/L)联合短片段RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰BiP转染处理成骨细胞2d,利用实时定量PCR和蛋白杂交技术检测BiP基因mRNA和蛋白水平,同时检测成骨细胞内成骨标志物和关键转录因子的变化.结果 染氟第1、3、7、14天,不同剂量氟处理组间细胞活性比较,差异有统计学意义(F=46.7、118.6、214.6、325.6,P均＜0.05).染氟20.0 mg/L未转染组成骨细胞的BiP基因mRNA水平较对照组显著升高(11.22±3.25比7.94±1.31,P＜0.05).染氟2.0 mg/L未转染组成骨细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)mRNA表达较对照组显著提高(12.81±3.62比6.86±2.13,P＜ 0.01),而染氟20.0 mg/L未转染组细胞的ALP mRNA表达显著下降(0.89±0.17比6.87±2.14,P＜ 0.01).与相同剂量氟处理组比较,染氟2.0、8.0 mg/L联合转染BiP siRNA组细胞ALP mRNA表达显著下降(12.81±3.62比7.43±2.06;5.92±2.38比3.96±0.21,P均＜0.05);染氟2.0 mg/L联合BiP siRNA转染组细胞骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA表达下降(4.29±0.99比1.29±0.86,P＜ 0.01).染氟2.0 mg/L未转染组细胞成骨细胞关键转录因子Runx2(Runt-related transcription factor 2)表达高于未转染对照组(6.61±0.48比2.66±0.39,P＜0.05).成骨细胞转染BiP siRNA后各加氟组Runx2表达较转染对照组显著下降(1.13±0.22比4.81±1.03,3.20±0.66比4.81±1.03,0.02±0.02比4.81±1.03,P均＜0.01).染氟2.0、20.0 mg/L细胞转染BiP siRNA后的Runx2 mRNA表达较相同剂量氟处理组明显降低(1.13±0.22比6.61±0.48;0.02±0.02比1.50±0.38,P均＜0.01).Runx2下游因子osterix的表达变化与染氟联合BiP siRNA转染细胞的Runx2改变一致.结论 BiP在氟刺激成骨作用中主要影响成骨标志物和关键转录因子的表达,而不是直接参与氟刺激成骨细胞作用.
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