期刊简介
中华医学会、哈尔滨医科大学主办。本刊主要报道克山病、大骨节病、碘缺乏病、地方性氟、砷中毒、鼠疫、布鲁杆菌病、寄生虫等疾病的研究成果。主要栏目：述评、综述、专家论坛、论著、现场调查、临床医学、检测方法、卫生管理、学术争鸣、防治经验等。《中国地方病学杂志》被美国《化学文摘》、荷兰《医学文摘》、美国《剑桥科学文摘》和波兰《哥伯尼索引》收录;是中国自然科学、中国生物医学核心期刊，预防医学、卫生学类核心期刊。2008年获中华医学会优秀期刊二等奖，2010年获中华医学会优秀期刊奖。
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首页>中华地方病学杂志
- 杂志名称：中华地方病学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华医学会,哈尔滨医科大学
- 国际刊号：2095-4255
- 国内刊号：23-1583/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：2000年获黑龙江优秀科技期刊奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 农业与生物科学研究中心文摘, 维普收录(中)
重组两歧双歧杆菌疫苗的构建、鉴定、表达及其免疫保护力研究
江帆；李文桂；刘潇
关键词：铜绿假单胞菌, 二裂菌属, 双歧杆菌属, 疫苗
摘要：目的 构建铜绿假单胞菌重组(r)两歧双歧杆菌(Bb)疫苗,研究疫苗免疫后铜绿假单胞菌攻击小鼠的免疫保护力.方法 将PCR扩增的铜绿假单胞菌重组外膜蛋白H(OprH)基因克隆至载体pGEX-1λT,电穿孔转化两歧双歧杆菌,得到rBb-pGEX-OprH疫苗.将疫苗进行PCR鉴定,再以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,并行蛋白质免疫印迹(Western blot)鉴定.将21只BALB/c小鼠按照随机数字表法分为rBb-pGEX-OprH疫苗组(简称疫苗组)、空载体组和Bb对照组(每组7只),分别用rBb-pGEX-OprH、rBb-pGEX-l λT或Bb行灌胃免疫,每天1次,连续3d,持续3周,于首次免疫后4周以5×107菌簇形成单位(CFU)铜绿假单胞菌滴鼻攻击,每天1次,连续3d.攻击2周后处死小鼠,计数肺细菌负荷.另于免疫前、首次免疫后4周、攻击感染后2周取静脉血,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定小鼠血清IgG水平.结果 PCR扩增出660 bp的OprH基因;PCR鉴定显示,rBb-pGEX-OprH疫苗构建成功;SDS-PAGE证实,重组疫苗可表达相对分子质量为47×103的融合蛋白,与预期结果一致;Western blot结果显示,表达蛋白可被铜绿假单胞菌感染的小鼠血清识别.3组小鼠肺细菌菌落数比较差异有统计学意义(F=1 506.793,P＜0.05),疫苗组肺细菌菌落数[(7.691±0.069)lgCFU/g]低于空载体组[(8.855±0.027)lgCFU/g]和Bb对照组[(8.958±0.037)lgCFU/g,P均＜0.05].疫苗免疫后4周,3组小鼠血清IgG水平比较差异有统计学意义(F=77.216,P＜0.05),其中疫苗组血清IgG水平(0.078土0.005)明显高于空载体组(0.054±0.004)和Bb对照组(0.052±0.004,P均＜0.05).结论 铜绿假单胞菌rBb-pGEX-OprH疫苗构建成功,且可诱导小鼠产生一定的保护力.
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